·糖尿病分子生物学与遗传学·

魏蕊 刘国强 洪天配 杨进 侯文芳 高美娟 娄晋宁 陈贵安

基金项目：国家863计划资助项目(2006AA02A112);国家自然科学基金资助项目(30771032，30700879，81070701);国家973计划资助项目(2006CB503900)

作者单位：100191北京大学第三医院临床干细胞研究中心(魏蕊、刘国强、洪天配、杨进、侯文芳、高美娟、陈贵安);卫生部中日友好医院(娄晋宁)

通讯作者：刘国强，E-mail:liuguoqiang@bjmu.edu.cn

【摘要】 目的 观察微小RNAs(miRNAs)在人类胚胎干细胞(hES细胞)向胰岛样细胞定向分化过程中的表达及其变化趋势。 方法 采用改良的定型内胚层途径的诱导方案将hES细胞诱导分化为胰岛样细胞;利用免疫荧光染色和实时定量PCR分析对诱导分化不同阶段的细胞进行鉴定;采用茎环结构的实时定量PCR方法观察诱导分化后细胞中3种miRNAs的表达，并与成人胰岛进行比较。 结果 hES细胞通过定型内胚层途径的诱导方案可在体外诱导分化为表达胰岛素、C-肽及胰多肽的胰岛样细胞。miR-7、miR-145及miR-375在hES细胞和诱导分化最后阶段的细胞中的表达水平较成人胰岛减低。 结论 通过现行的体外诱导分化方案所获得的胰岛样细胞不是成熟的胰岛细胞，miR-375等miRNAs表达水平低是其特征之一。