·基础论著·

作者：王德光 李学旺 李航 陈丽萌 段琳 李艳

作者单位：100730北京，中国协和医科大学中国医学科学院北京协和医院肾内科(第一作者王德光现在安微医科大学附属省立医院肾内科工作)

通讯作者：李学旺，E-mail:lxw@pumch.cn

【摘要】目的探讨胰岛素诱导人肾小球系膜细胞(HMC)血管内皮细胞生长因子(VEGF)基因转录机制。方法(1)用VEGF报告质粒或低氧诱导因子1 (HIF-1)结合位点畸变的VEGF mut报告质粒转染HMC，荧光素酶分析法检测其转录活性;(2)应用Real-time PCR、Western blot法分别检测HIF-1α mRNA和蛋白表达。结果(1)胰岛素呈剂量依赖性增加VEGF基因转录，在100nmol/L时达高峰，为未刺激组的2.14±0.17倍(P<0.01)，但对转染VEGF mut报告质粒的HMC VEGF基因转录无影响;(2)Ly294002和雷帕霉素均可抑制胰岛素诱导的VEGF基因转录(P<0.01);(3) 胰岛素呈时间依赖性上调HIF-1α蛋白表达，4h达高峰，为对照组的2.35±0.35倍(P<0.01)，但对其mRNA表达无影响。结论胰岛素通过激活PI3K/mTOR通路和上调HIF-1α蛋白表达诱导HMC VEGF基因转录。