·基础论著·

基金项目：EFSD Grant Award for Collaborative Diabetes Research between China and Europe supported by Bristol-Myers-Squibb to Dai-Qing Li;天津市应用与基础及前沿技术研究计划重点项目(08JCZDJC25100)

作者单位：300070卫生部及天津市激素与发育重点实验室，天津医科大学代谢病医院(汤云昭、于德民、孙富军、历丽、冯书红、李代清);天津医科大学总医院(董作亮)

【摘要】目的 探讨大鼠胰岛β细胞中65kDa的mini-P糖蛋白存在的可能性及其在两相胰岛素分泌中的作用。方法 分别提取Wistar大鼠胰岛、胰腺及INS-1细胞中的总RNA，RT-PCR法检测多药耐药基因1(MDR1)的表达;萃取大鼠胰岛及INS-1细胞蛋白，用P糖蛋白特异性抗体C219行免疫印迹实验，检测P糖蛋白和mini-P糖蛋白的表达;体外胰岛刺激实验测定两相胰岛素分泌。结果 在提取的大鼠胰岛、胰腺及INS-1细胞中均扩增出了MDR1基因。在胰岛匀浆蛋白中探测到65kDa的mini-P糖蛋白，在INS-1细胞蛋白萃取液中探测到了160kDa的P糖蛋白。在体外胰岛刺激实验中，P糖蛋白拮抗剂环孢菌素A抑制了胰岛素第二时相分泌, 但第一时相分泌无明显变化。结论 在INS-1细胞中有P糖蛋白的表达，在大鼠胰岛中有mini-P糖蛋白的表达，与胰岛素的两相分泌相关。