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论文题名(英): Mechanisms of human proinsulin DNA vaccine preventing islet beta-cell apoptosis in NOD mice
作者: 罗建华 周智广 蒋铁建 裴剑浩 李霞 何凌 孙曙光 LUO Jian-hua ZHOU Zhi-guang JIANG Tie-jian
作者单位: 410011,长沙,中南大学湘雅二医院代谢内分泌研究所,中南大学糖尿病中心
刊名: 《中华糖尿病杂志》
英文刊名: CHINESE JOURNAL OF DIABETES
出版年份 /卷 /刊期: 2005 / 13 / 5
关键词: DNA疫苗 胰岛素原 胰岛炎 凋亡 小鼠,近交NOD
摘要: 目的探讨人胰岛素原 DNA疫苗预防非肥胖糖尿病(NOD)小鼠胰岛β细胞凋亡的机制. 方法 (1)4周龄NOD雌鼠随机分为磷酸盐缓冲液(PBS)、质粒载体PcDNA3.1(PcDNA)、胰岛素原(PIns)3组,由胫前肌分别注射PBS、质粒PcDNA3.1、人胰岛素原 DNA疫苗50 μg,1周后重复1次.(2)各组取12周龄未发病的NOD鼠10只,分离胰腺,HE染色观察胰岛炎;TUNEL+SABC法检测胰岛β细胞凋亡;取脾制成细胞悬液培养72 h,ELISA法测定血清白介素4(IL-4)和γ干扰素(IFN-γ)水平;MTT法检测脾细胞增殖反应. 结果 (1)12周龄时PIns组正常胰岛比例高于PBS组和PcDNA组(均P<0.01),胰岛周围炎比例低于PcDNA组(P=0.02),胰岛内炎比例则低于PBS组(P<0.01)和PcDNA组(P=0.006);(2)PIns组胰岛β细胞凋亡率低于PBS组和PcDNA组(均P<0.01);(3)PIns组血清IL-4/IFN-γ比值显著高于PBS组(P=0.014)和PcDNA组(P=0.036);(4)PIns组脾细胞对人胰岛素增殖反应的刺激指数(SI)低于PcDNA组(P=0.021). 结论人胰岛素原 DNA疫苗通过上调IL-4/IFN-γ比值,使免疫平衡向Th2偏移,致NOD鼠胰岛炎减轻,胰岛β细胞凋亡减少.
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