《中国糖尿病杂志》  | 发布:2018-03-22

高糖对循环纤维细胞增殖和趋化因子受体4、结缔组织生长因子表达影响的研究

【摘要】 目的 探讨高糖对循环纤维细胞增殖和趋化因子受体4(CXCR4)、结缔组织生长因子(CTGF)表达的影响。 方法 选取2016年6月至2017年6月于浙江医院心内科住院的15例T2DM患者(T2DM组),以及同期体检健康的15名血糖正常者(NGT组)。密度梯度离心法获取两组外周血单个核细胞,经培养、鉴定后分别用含不同浓度葡萄糖DMEM培养基(5.5、25、30mmol/L葡萄糖和5.5mmol/L葡萄糖+30mmol/L甘露醇)干预不同时间(24、48、72 h),采用细胞计数试剂(CCK-8)测定细胞增殖能力,Western blot检测CXCR4和CTGF的表达情况(48 h)。另收集两组外周血各5ml,采用流式细胞术测定外周血循环纤维细胞含量。 结果 经14d培养,循环纤维细胞光镜下呈典型梭形。激光共聚焦显微镜显示细胞CD45(绿色)和胶原蛋白Ⅰ(COL-I)(红色)表达明显,且T2DM组梭形细胞较NGT组增多。CCK-8检测显示葡萄糖对循环纤维细胞的增殖能力呈明显的浓度依赖性,以30mmol/L干预48 h最显著(P<0.01)。Western blot显示,干预48 h后,葡萄糖呈浓度依赖性刺激循环纤维细胞CXCR4和CTGF的表达(P<0.01)。流式细胞术检测显示,T2DM组外周血单个核细胞中的CD45 + COL-I+ 双染阳性的循环纤维细胞含量高于NGT组[(1.93±1.01) vs (0.52±0.35),P<0.01]。 结论 T2DM患者外周血中CD45+ COL-I +循环纤维细胞含量明显升高。体外高浓度葡萄糖可刺激循环纤维细胞的增殖能力,促进CXCR4和CTGF分泌,提示循环纤维细胞可能参与糖尿病器官纤维化的病理生理过程。


作者: 翁莹政 娄江杰 杜常青 刘小伟 徐晨凯 曾广忠 唐礼江
通信作者: 唐礼江